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Kit qScriber™ de sintesis de cDNA

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qScriber™ cDNA Synthesis Kit : Síntesis de ADNc rápida y confiable para análisis de expresión génica.

 

SKU: RTK01 Category: Tag:

Descripción

El kit de síntesis de ADNc qScriber™ es un sistema altamente eficiente y fácil de usar para la síntesis de ADNc que elimina la necesidad de una tediosa optimización de reacciones. La mezcla de enzimas qScriber™ garantiza una detección de alta sensibilidad a partir de objetivos con un número de copias bajo. La transcriptasa inversa HighScriber™ altamente activa y termoestable combinada con un inhibidor de ARNasa permite una síntesis eficiente de ADNc y seguridad de reacción. El amplio rango de temperaturas de reacción (38 °C – 55 °C) garantiza una transcripción eficiente a partir de plantillas ricas en GC.

La mezcla de reacción 5X qScriber™ incluye concentraciones óptimas de magnesio y dNTP y una combinación de oligo (dT) anclado y hexámeros aleatorios para una representación imparcial de los extremos del ARNm. El kit es una opción óptima para generar ADNc de alta calidad a partir de ARN viral, miARN u otros objetivos para qPCR o PCR. Para mayor comodidad, el kit incluye incluso agua de PCR para configurar la reacción, por lo que lo único que debe cuidar es la plantilla de ARN de alta calidad.

La síntesis de ADNc (ADN complementario o copia) es una técnica fundamental utilizada tanto en la investigación de biología molecular como en aplicaciones de diagnóstico. El proceso de transcripción inversa emplea enzimas transcriptasa inversa (RT), inhibidores de RNasa, plantilla, hexámero aleatorio, oligo dT o cebadores específicos y dNTP. El ADNc se produce con el objetivo de realizar diferentes aplicaciones posteriores. Por ejemplo, para fines de clonación se toman cebadores específicos y se realiza la PCR después de la síntesis de ADNc para generar fragmentos de ADN largos para la clonación en vectores plasmídicos y para la secuenciación. Para fines de análisis de expresión génica, se utilizan cebadores aleatorios cortos y los fragmentos cortos de ADNc generados representan imparcialmente el genoma completo para el análisis de qPCR.

Un buen kit de síntesis de ADNc proporciona altos rendimientos de ADNc de alta calidad con un sesgo o variabilidad mínimos. Para objetivos complejos que contienen regiones con alto contenido de GC, se prefieren las transcriptasas inversas termoestables, ya que permiten realizar la reacción a temperaturas más altas, lo que previene la formación de estructuras secundarias y aumenta el rendimiento de ADNc. Normalmente, la temperatura óptima para la síntesis de ADNc oscila entre 37 y 42 °C, dependiendo de la enzima transcriptasa inversa utilizada. Las enzimas RT avanzadas alcanzan temperaturas de hasta 55 °C y más.

La optimización del protocolo de síntesis de ADNc es crucial para generar bibliotecas de ADNc precisas. Varios factores pueden influir en la calidad y el rendimiento del ADNc, incluida la cantidad y calidad del molde de ARN, la concentración y calidad de la enzima transcriptasa inversa, la calidad de los cebadores y la temperatura de síntesis del ADNc.

Especificaciones

Catalogos:

RTK0101  25 reacciones de 20 µl

RTK0104  100 reacciones de 20 µl

 

Aplicaciones

• Generación de plantillas de ADNc para qPCR o PCR.

• Síntesis imparcial y eficiente de ADNc.

• Detección de cantidades objetivo bajas.

• Síntesis de ADNc a partir de plantillas complejas.

Beneficios

• Transcriptasa inversa termoestable HighScriber™ mezclada con inhibidor de ribonucleasa para una síntesis eficiente de ADNc.
• Mezcla de reacción optimizada con oligo (dT) y cebadores aleatorios para una representación imparcial de los extremos del ARNm.
• Síntesis de ADNc a partir de plantillas complejas hasta 55 °C.

• Detección de alta sensibilidad a partir de 1 pg de plantilla de ARN total.

Documentación

Documento

 

Publicaciones

Protein Kinase D is dispensable for development and survival of Drosophila melanogaster  Genes, Genomes, Genetics, 2019 D Maier, AC Nagel, A Kelp.   cDNA was produced with qScriber cDNA Synthesis Kit (highQu, Kraichtal, Germany) according to the manufacturer’s protocol.

Sequence and structural properties of circular RNAs in the brain of nurse and forager honeybees (Apis mellifera)  2019 – bmcgenomics,   C. Thölken, M Thamm, C Erbacher.  Total brain RNA wastranscribed using qScriber cDNA Synthesis Kit (highQu,Kraichtal, Germany)

Loss of putzig in the germline impedes germ cell development by inducing cell death and new niche like microenvironments  Scientific reports, 2019, L Kober, M Zimmermann.  mRNA was reverse transcribed with qScriber cDNA Synthesis Kit (highQu, Kraichtal, Germany).

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