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Mezcla de transcriptasa inversa HighScriber™

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• Transcriptasa inversa termoestable mezclada con inhibidor de ribonucleasa para una síntesis eficiente de ADNc.
• Altos rendimientos de transcripciones completas de hasta 12-15 kb.
• Síntesis de ADNc a partir de plantillas complejas hasta 55 °C.

• Detección de alta sensibilidad a partir de 1 pg de plantilla de ARN total.

SKU: RTM030 Category: Tag:

Descripción

La mezcla de transcriptasa inversa HighScriber™ es una herramienta premium para la transcripción inversa de alta eficiencia de ADNc de hasta 12-15 kb de longitud. La mezcla incluye transcriptasa inversa HighScriber™ e inhibidor de ribonucleasa para una síntesis segura y robusta de ADNc y facilidad de uso. La transcriptasa inversa HighScriber™ permite una alta sensibilidad de detección a partir de 1 pg de ARN total. El amplio rango de temperaturas de reacción (38 °C – 55 °C) garantiza una síntesis eficiente de ADNc a partir de plantillas complejas o ricas en GC.

La enzima utiliza ssRNA o ssDNA como plantilla y no posee actividad de ribonucleasa H detectable específica del ARN en híbridos de ARN-ADN. Una actividad de Ribonucleasa H altamente reducida permite la transcripción de transcripciones completas. La transcriptasa inversa HighScriber™ se puede utilizar para RACE ya que tiene actividad transferasa terminal: agrega citosinas a los extremos 3′ del ADNc. El inhibidor de ribonucleasa premezclado con la RT garantiza la protección del ARN contra la degradación de la ribonucleasa. El tampón 5X ALLin™ HighScriber suministrado incluye todo lo necesario para la reacción de síntesis de ADNc. Para minimizar los pasos de pipeteo, contiene MgCl2, dNTP, potenciadores y estabilizadores. Lo único que se puede agregar es el ARN molde y el cebador.

Especificaciones

Catalogos:

RTM0301    10000u

RNTM305   50000u

 

Aplicaciones

• Síntesis de ADNc de transcripciones de hasta 15 kb de longitud. • Generación de plantillas para RT-PCR y RT-qPCR.
• Síntesis de ADNc a partir de plantillas complejas.

 

La mezcla de transcriptasa inversa HighScriber™ es una herramienta premium para la transcripción inversa de alta eficiencia de ADNc de hasta 1215 kb de longitud. La mezcla incluye transcriptasa inversa HighScriber™ e inhibidor de ribonucleasa para una síntesis segura y robusta de ADNc y facilidad de uso. La transcriptasa inversa HighScriber™ permite una alta sensibilidad de detección a partir de 1 pg de ARN total.

Documentación

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Elegir la transcriptasa inversa correcta

Las diferentes transcriptasas inversas utilizadas para la síntesis de ADNc tienen diferentes propiedades y, por lo tanto, no todas son adecuadas para las mismas aplicaciones. A continuación se detallan algunos factores importantes a considerar al elegir la transcriptasa inversa adecuada:

• Algunas transcriptasas inversas funcionan a temperaturas más bajas, como 42 °C (MMuLV RT), mientras que las transcriptasas inversas termoestables funcionan a temperaturas más altas, como 50 °C o 55 °C (highQu HighScriber™ RT). Cuanto más complejas se transcriben las plantillas, se recomienda una temperatura más alta para alterar las estructuras secundarias del ARN.

• Las transcriptasas inversas pueden tener preferencias de plantillas y ser más eficientes a la hora de sintetizar ADNc a partir de determinadas plantillas de ARN, como el ARNm, mientras que otras pueden sintetizar ADNc a partir de una gama más amplia de plantillas de ARN.

• La sensibilidad de una transcriptasa inversa se vuelve especialmente importante si la muestra de ARN tiene una concentración de número de copias baja. No todas las enzimas pueden sintetizar eficientemente ADNc a partir de pequeñas cantidades de ARN.

• La velocidad de las transcriptasas inversas también difiere. Algunas enzimas RT funcionan más rápido que otras y garantizan un alto rendimiento en la síntesis de ADNc en menos tiempo. Las buenas enzimas generalmente se suministran con reactivos de transcripción inversa optimizados para garantizar altos rendimientos de transcripción inversa, permitir protocolos de alta temperatura, proporcionar una alta especificidad y una síntesis de ADNc imparcial.

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